HepG2 /  细胞介绍

HepG2细胞是来源于一个15岁白人的肝癌组织；分泌多种血浆蛋白：清蛋白、α2-巨球蛋白、血纤维蛋白溶酶原、转铁蛋白等；模式染色体数为55；该细胞在免疫抑制小鼠中不致瘤；是一个合适的转染宿主；表达标志物包括胰岛素受体；胰岛素样生长因子II（IGF II）受体。

 

HepG2可以分泌多种血浆蛋白，主要用于肝癌的实验研究。可以研究细胞的增殖活性、凋亡能力、对药物的反应等情况，也可以将HepG2细胞种植在小白鼠或大鼠的体内形成人工的肝细胞癌，之后用药物来治疗这种人工的肝细胞癌，观察用药治疗的效果。

 

名称	HepG2（人肝癌细胞）
形态	上皮样
生长特性	贴壁；传代比例 1:4 -1:6
营养体系	MEM(C3050-0500) + 10% FBS(C04002)

HepG2

人肝癌细胞

 

 

HepG2 /  细胞复苏

1. 配制完全培养基：基础培养基+胎牛血清+双抗（特殊培养基特殊配置）；

2. 细胞复苏：取5ml完全培养基于15ml离心管中，37℃水浴锅预热，从液氮罐（或者-80℃冰箱）中快速取出冻存的细胞，放入37℃水浴锅中，摇晃使快速化冻（1min左右），然后将化冻的细胞和预热的培养基，移入超净工作台中，化冻的细胞加入到含预热培养基的15ml离心管中，1000rpm离心5min；

3. 吸弃上清，得到细胞沉淀，用2ml完全培养基轻轻重悬细胞，加入到T25培养瓶中，做好标记，放入37℃，5%CO₂饱和适度培养箱中培养（培养皿复苏效果更好）；

4. 24h后，观察细胞贴壁情况（未贴壁的即为死细胞--针对贴壁细胞），吸弃旧培养基，加入新鲜的预热（室温或37℃）的完全培养基，继续培养。

 

 

HepG2 /  细胞传代

细胞一般是3、4天传代一次。若是长时间该换液不换液或者不传代也换液就容易导致细胞漂浮死亡吸去培养液。用PBS轻微冲洗一遍，加入不含EDTA的0.25%胰酶，放置在37℃的培养箱中，2分钟，即可轻松吹打下来。再放入1.5ml锥型离心管中，800转每分钟，离心3分钟，目的是除去细胞碎片等其他杂质，使细胞更加干净。后将离心管中上清液吸出，只留下沉淀，再加入新鲜的完全培养基，吹打均匀后加入到细胞瓶中或者平皿中。

 

 

HepG2 /  细胞冻存

1. 90%血清+10%细胞培养级别的DMSO，先放入冻存盒中12小时至24小时。

2. 后转移到液氮当中。如没有冻存盒，则需要将细胞放入4℃冰箱中12小时左右。

3. 再转移至-20℃12小时左右，再转移到-80℃后12小时左右，最后放入液氮。

 

 

HepG2

细胞状态好的形态学表现有哪些？

细胞状态好的特点：细胞克隆成岛状，背景干净

 

 

HepG2

传代时，怎样才能使HepG2消化成单个细胞？

长势良好的HepG2

 

原因推断：HepG2在体外培养时容易聚团呈岛状，且如果长得过满，轻度消化就成片下来，容易成团。

 

解决办法：

1. 融合率达到80%即可传代，长太满容易成片脱落。

2. 先用胰酶消化约3分钟，用完培终止消化作用，然后用移液管将细胞悬液吸起，将管口稍微用力按在培养瓶底部，用力快速将细胞悬液挤出（可重复一次），可有效减轻细胞聚团。
    

 

HepG2

细胞主要用于哪些实验研究？
 

肝炎病毒研究：HepG2是常用的研究HBV和HCV细胞系模型，利用CRISPR/Cas9构建基因敲除HepG2的HBV感染细胞模型细胞，为彻底治愈乙肝提供新思路。

 

体外肝癌（HCC）模型：HepG2中p53抑癌基因无突变，因此可用于研究p53与肝细胞癌（HCC）的密切关系，以及HCC的发病、诊治、预防。

 

药物研究：肝脏是人体内药物代谢的最主要器官，也是重要的解毒器官。HepG2细胞系无论在形态上还是功能上都更接近于人的肝组织，该细胞系常用于药物代谢和肝毒性研究。

 

注：本文部分内容来源于网络，仅做学习参考使用。

 

 

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